人妻蜜桃久久AV一区,亚洲无码免费在线观看,BBB片一毛片A片AA少妇,91人妻人人人人爽
NEWS CENTER
新聞中心
資訊分類
-
-
-
“最小”的CRISPR-Cas3系統(tǒng) 可快速準(zhǔn)確刪除DNA片段,編輯效率近100%

“最小”的CRISPR-Cas3系統(tǒng) 可快速準(zhǔn)確刪除DNA片段,編輯效率近100%

  • 分類:行業(yè)資訊
  • 作者:
  • 來(lái)源:
  • 發(fā)布時(shí)間:2021-12-11 20:59
  • 訪問(wèn)量:

“最小”的CRISPR-Cas3系統(tǒng) 可快速準(zhǔn)確刪除DNA片段,編輯效率近100%

【概要描述】CRISPR-Cas技術(shù)使人們能在真核生物和原核生物進(jìn)行可編程的基因組編輯。然而,主流的Cas9和Cas12a酶在進(jìn)行大規(guī)模刪除的能力方面具有局限性。近日,有研究人員開發(fā)出一種緊湊型級(jí)聯(lián)CRISPR-Cas3系統(tǒng),可快速準(zhǔn)確對(duì)大規(guī)模DNA片段進(jìn)行刪除。

  • 分類:行業(yè)資訊
  • 作者:
  • 來(lái)源:
  • 發(fā)布時(shí)間:2021-12-11 20:59
  • 訪問(wèn)量:
詳情

       該系統(tǒng)稱為Cascade–Cas3,由進(jìn)行性核酸酶Cas3,以及一個(gè)基于Type IC Cascade的最小系統(tǒng)組成,用于對(duì)細(xì)菌的基因組進(jìn)行編輯。在單一CRISPR RNA的引導(dǎo)下,DNA切割在銅綠假單胞菌中產(chǎn)生了大規(guī)模刪除(7–424千堿基),效率接近100%。


        這項(xiàng)工作由加州大學(xué)舊金山分校(UCSF)的Joseph Bondy-Denomy博士領(lǐng)導(dǎo),并于10月19日發(fā)表于《自然-方法》雜志,題為“A compact Cascade–Cas3 system for targeted genome engineering”。


        該Cas3系統(tǒng)可用來(lái)切碎Cas9片段,刪除長(zhǎng)段DNA。而且它的精度很高,是少有的高質(zhì)量大規(guī)模編輯工具。Cas3作為這一最小的CRISPR系統(tǒng)的一部分,結(jié)合了準(zhǔn)確性和可變性,已高效地完成了高達(dá)424 kb的基因組刪除。


        在該研究中,科學(xué)家選擇并改良了銅綠假單胞菌所使用的CRISPR-Cas3系統(tǒng)。他們表示,該系統(tǒng)符合“最小”類型IC CRISPR-Cas系統(tǒng)的要求。也就是說(shuō),它僅利用三個(gè)cas基因(cas5,cas8和cas7)來(lái)產(chǎn)生可組成Cas3的crRNA導(dǎo)向的Cascade監(jiān)視復(fù)合物。


        研究人員將該CRISPR-Cas3系統(tǒng)用于基因組編輯,并評(píng)估了它在銅綠假單胞菌和其他三種微生物中的功能,即大腸桿菌、丁香假單胞菌和肺炎克雷伯菌。他們測(cè)試了三種應(yīng)用:大毒力區(qū)域的一步刪除、多重靶向和質(zhì)粒固化。


        研究人員寫道:“由單個(gè)CRISPR RNA引導(dǎo)的DNA切割在銅綠假單胞菌中產(chǎn)生了大規(guī)模刪除(7–424千堿基),效率接近100%,而相比之下,Cas9則只產(chǎn)生了小規(guī)模的刪除和點(diǎn)突變。Cas3產(chǎn)生了來(lái)自編程位點(diǎn)的雙向缺失,可將銅綠假單胞菌基因組減少837 kb(13.5%)。在使用Cascade-Cas3進(jìn)行編輯時(shí),同源定向修復(fù)模板可以有效地指定大的缺失邊界,但Cas9沒(méi)有。


        研究人員認(rèn)為,這種源自銅綠假單胞菌的緊湊型CRISPR-Cas3系統(tǒng),可作為一種新的工具從細(xì)胞基因組中切割出更大的DNA片段,并用于開發(fā)新療法以及研究人類和其他生物的疾病以及正常功能的基因編輯。


        Bondy-Denomy說(shuō),其他的CRISPR-Cas3系統(tǒng)已經(jīng)在人類和其他哺乳動(dòng)物細(xì)胞中工作,對(duì)于改良的銅綠假單胞菌系統(tǒng)也應(yīng)該可以實(shí)現(xiàn)。


        眾所周知,CRISPR-Cas9集成體可在目標(biāo)位點(diǎn)快速精確地切除少量DNA。然后可以使用其他方法插入新的DNA。但是,UCSF科學(xué)家采用的新型CRISPR-Cas3系統(tǒng)卻有所不同。該系統(tǒng)中的關(guān)鍵酶Cas3可快速、準(zhǔn)確地去除更長(zhǎng)的DNA片段。


        Bondy-Denomy解釋說(shuō):“ Cas3就像帶電動(dòng)機(jī)的Cas9一樣,找到特定的DNA靶標(biāo)后,它就可以在DNA上運(yùn)行并像吃豆人一樣咀嚼它,與Cas9不同的是,當(dāng)Cas3精確地與其DNA靶結(jié)合時(shí),它開始在兩個(gè)方向上咀嚼雙鏈DNA的一根鏈,從而暴露出一條單鏈。”


        在UCSF實(shí)驗(yàn)中獲得的缺失大小不等,在許多情況下包含多達(dá)100個(gè)細(xì)菌基因。研究人員發(fā)現(xiàn),CRISPR-Cas3機(jī)制還可使新DNA序列更容易取代缺失的DNA。


該論文的作者補(bǔ)充說(shuō):“ CRISPR-Cas3是用于真核細(xì)胞的一種特別有前途的工具,因?yàn)樗鼘⒋龠M(jìn)對(duì)大部分非編碼DNA片段的詢問(wèn),其中大部分功能未知。此外,最近發(fā)現(xiàn),Cas9產(chǎn)生的'基因敲除'(即,導(dǎo)致插入框外突變的小indels)經(jīng)常編碼可能產(chǎn)生蛋白質(zhì)產(chǎn)物的假mRNA,因此需要采取全基因去除的方法。”


        根據(jù)Bondy-Denomy的說(shuō)法,沒(méi)有一種簡(jiǎn)單可靠的方法可以刪除細(xì)菌中很大的DNA區(qū)域,并用于研究或治療目的。他建議說(shuō):“現(xiàn)在,不需要做100個(gè)不同的小DNA缺失。取而代之的是,可以只刪除一個(gè),然后看看有什么變化。”


        他表示,由于細(xì)菌和其他類型的細(xì)胞通常用于生產(chǎn)基于小分子或蛋白質(zhì)的藥物,因此CRISPR-Cas3將使生物技術(shù)行業(yè)的科學(xué)家能夠更輕松地從這些細(xì)胞中去除潛在的致病性或無(wú)用的DNA。大范圍的細(xì)菌DNA廣為人知,其未知的功能在某些情況下對(duì)于生存是不必要的。此外,細(xì)菌DNA包含從其他來(lái)源導(dǎo)入的大片段DNA,這可能導(dǎo)致細(xì)菌在人的宿主中引起疾病,或轉(zhuǎn)移細(xì)菌的新陳代謝。


        CRISPR-Cas3還可以在工業(yè)、農(nóng)業(yè)甚至人類基因治療應(yīng)用中將整個(gè)基因插入基因組。


        在這項(xiàng)最新的CRISPR-Cas3研究中,通過(guò)操縱提供給細(xì)菌的DNA序列來(lái)修復(fù)缺失,研究人員能夠精確設(shè)置這些大DNA修復(fù)的邊界,而這是CRISPR-Cas9無(wú)法完成的。


        Bondy-Denomy先前發(fā)現(xiàn)了反CRISPR策略,噬菌體進(jìn)化為與細(xì)菌抗?fàn)?,這些策略可能被證明可用于在副作用出現(xiàn)之前阻止用作人類治療劑的Cas酶驅(qū)動(dòng)的基因編輯反應(yīng),或用于利用噬菌體去除有害細(xì)菌。他說(shuō),那些填滿了腸道的東西。除了大腸桿菌和其他幾個(gè)物種以外,人們對(duì)那里通常居住的1000多種細(xì)菌物種知之甚少。


        他總結(jié)道:“非模型微生物在遺傳學(xué)世界中已被很大程度上拋在了后面,因此我們非常需要開發(fā)研究它們的新工具。”

搜索
ss
ss
這是描述信息

電話:13373899305

座機(jī):0574-86818897

郵箱:ceo@shmlrs.cn

地址:寧波市保稅西區(qū)創(chuàng)業(yè)大道7號(hào)4幢305室  

工作時(shí)間:周一~周五 9:00~17:30(北京時(shí)間)

版權(quán)所有? 2021  寧波美麗人生醫(yī)藥生物科技發(fā)展有限公司

浙ICP備2022004133號(hào)-1  網(wǎng)站建設(shè):中企動(dòng)力 上海

亚洲AV无码乱码在线 | 国产精品伦人视频免费看三丽医院 | 国产精品免费观看 | 一级高清无码视频 | 中文字幕无码电影 | 巜少妇的滋味2做爰动漫 | 91 国产丝袜在线播放竹菊 | 91在线无码精品秘 蜜桃按摩 | 久久国产一级黄色视频 | 国产一区二区丝袜高跟 | 少妇高潮久久久久久潘金莲 | 先锋影音资源女人一区二区三区 | 日本欧美中文在线视频 | www.色在线观看 | 亚洲色婷婷国产精品杨思敏 | 黄色国产视频在线免费观看 | 欧美精品-老牛影视内射 | 日韩欧美精品无码视频 | 欧美性猛交XXXX乱大交3未删减版 | 伦伦影院午夜理论片痴汉 | 韩国无码成人三区在线观看 | 特级做a爰片毛片免费69 | 四川BBBB躁少妇BBBB躁 | 人妻丰满熟妇av无码一区二区 | 精国产品一区二区三区A片 四川少妇bbbbbbbw | 精品国产一区二区国模嫣然 | 无码人妻精品一区二区三区老鸭窝 | 全国AV无码久久 | 亚洲一区二区无遮挡A片 | 高潮呻吟久久AV无码购买 | 欧一美一性一交一乱一性一 | 97人妻无码一区二区三区精品免费 | 肥老熟妇伦子伦456视频 | 亚洲国产自制视频在线观看 | www.草莓av.com | 真人操逼视频丰满性感内谢高清 | 风流少妇A片一区二区蜜桃 真实露脸农村妇女23p | 国产小视频在线观看 | 欧美精品久久人妻无码网站仙踪林 | 狠狠躁夜夜躁人人爽蜜桃 | 久久午夜夜伦鲁鲁片无码免费 |